北京美德泰康生物科技有限公司
BEIJING MDTK BIOLOGY TECHNOLOGY CO.LTD
They invent.They imagine.They heal.
They explore.They create.They inspire.
They push the human race forward.
——“Think Different”
1975年,德國科學家Georges J. F. K?lhler和阿根廷/英國科學家César Milstein在英國《自然》雜志上發表了題為“分泌具有預定特異性抗體的融合細胞的持續培養”(Continuous cultures of fused cells secreting antibody of predefined specificity)的著名論文。他們大膽地將次黃嘌呤-鳥嘌呤磷酸核糖轉移酶(hypoxanthine guanosine phosphoribosyl transferase,HGPRT)缺陷型的骨髓瘤細胞株與經綿羊紅細胞免疫的小鼠脾臟細胞進行融合,融合由仙臺病毒介導。融合后的細胞在含有次黃嘌呤(hypoxanthine,H)、氨基喋呤(aminopterin,A)和胸腺嘧啶核苷(thymidine,T)的培養基(HAT)中生長進行選擇。只有骨髓瘤細胞與脾細胞形成的雜交瘤細胞因得到分別來自親本脾細胞的HGPRT和親本 骨髓瘤細胞的連續繼代特性,而在HAT培養基中存活下來。
單抗技術的問世,不僅帶來了免疫學領域里的一次革命,而且它在生物醫學科學的各個領域獲得極廣泛的應用,促進了眾多學科的發展。
里程碑Ⅰ
項目方案設計
n 提供1-3個抗原序列供客戶進行選擇
根據客戶提供信息(蛋白英文全稱、序列信息、種屬信息),使用Pre-Antigen蛋白抗原表位預測軟件對目標序列進行抗原表位分析、同源分析以及抗體應用分析,制定項目方案,每個方案提供1-3個抗原供客戶進行選擇。
里程碑Ⅱ
抗原制備
n 多肽合成(常規多肽、磷酸化、甲基化、乙酰化修飾性多肽)
n 多肽偶聯至載體蛋白(BSA、KLH、OVA)
n 蛋白類抗原進行表達純化
n 客戶提供抗原進行含量與純度的質控
里程碑Ⅲ
動物免疫(ELISA效價>16000)
n 初次免疫5只小鼠(Balb/c、ICR、昆明小鼠);免疫佐劑(IFA弗氏非完全佐劑)
n 第一次加強免疫;免疫佐劑(CFA弗氏非完全佐劑)
n 第二次加強免疫;免疫佐劑(CFA弗氏非完全佐劑)
n 第三次加強免疫;免疫佐劑(CFA弗氏非完全佐劑)
n 血清效價評估:ELISA
里程碑Ⅳ
n 獲得1000株雜交瘤細胞
n 第一次ELISA篩選
n 第二次ELISA篩選(特異性、交叉反應)
n 第三次ELISA篩選(抗體亞型鑒定)
n 擴大培養
n 細胞凍存
里程碑Ⅴ
客戶篩選及亞克隆
n 收集5ml/株上清郵寄給客戶進行鑒定
n 半固體培養基法亞克隆篩選
相關項目
n 細胞支原體檢測
n 細胞無血清培養基(Serum Free)、化學成分限定培養基(Chemical Defend)馴化
n 細胞上清抗體制備
n 腹水抗體制備
n 抗體標記
n 抗體凍干
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